液氮(dan)水平(ping)對細胞儲(chu)存罐(guan)溫度的(de)影響(xiang)

　　　該(gai)實(shi)驗(yan)在愛達荷(he)大(da)學動物、獸(shou)醫(yi)和食(shi)品科學系的(de)生殖生(sheng)理(li)學實(shi)驗(yan)室進(jin)行。實(shi)驗(yan)期間(jian)實(shi)驗(yan)室的(de)溫度約(yue)為22°C。

　　使(shi)用(yong)容(rong)量(liang)為(wei)30L的(de)液(ye)氮(dan)儲罐(Union Carbide Linde，LR-30型(xing)，美國(guo))。在(zai)實(shi)驗(yan)期間(jian)，該(gai)罐(guan)中(zhong)沒(mei)有儲存精液(ye)。罐(guan)頸直徑為7cm，頸(jing)管長度為12cm，與(yu)牧(mu)民(min)授(shou)精員(yuan)和專(zhuan)業(ye)人工(gong)智(zhi)能技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)目前(qian)在奶(nai)牛(niu)場使(shi)用(yong)的(de)罐相(xiang)似(si)。在(zai)實(shi)驗(yan)開(kai)始時，向(xiang)罐(guan)中(zhong)填充18L液(ye)氮(dan)(相當於22cm)。使(shi)用(yong)配備有能夠進(jin)行6秒(miao)響(xiang)應(ying)時(shi)間(jian)的空(kong)氣(qi)(氣(qi)體)探頭(tou)的(de)手持(chi)式(shi)熱電(dian)偶(ou)溫度計(ji)(TM602;Palmer Wahl Instrumentation Group，Asheville，NC，USA)在三(san)個位(wei)置(zhi)采(cai)集(ji)溫(wen)度(du)測量(liang)值(zhi)：1)頸(jing)部部下方2 cm(霜線(xian)上方)，2)頸部部以下7 cm(霜線(xian)上和建(jian)議(yi)的精液(ye)吸(xi)管移(yi)除位(wei)置(zhi)下方)，3)液氮(dan)液位(wei)上方2 cm(圖(tu)1)。

　　通(tong)過用(yong)不(bu)銹(xiu)鋼(gang)勺(shao)手動(dong)去除液氮(dan)，罐中的液(ye)氮(dan)液位(wei)從22厘(li)米(mi)逐(zhu)漸降低(di)到7厘(li)米(mi)(液(ye)氮(dan)的體積(ji)分(fen)別從18升(sheng)逐(zhu)漸降低(di)到6升)。如(ru)前(qian)所(suo)述(shu)，在(zai)每(mei)個(ge)位(wei)置(zhi)測量(liang)溫(wen)度(du)四(si)次(ci)，罐中有22、20、19、18、16、12、10和7cm的(de)液氮(dan)。每次溫度(du)測量(liang)之間(jian)的間(jian)隔時(shi)間(jian)至(zhi)少為2小(xiao)時(shi)，以便有足夠的(de)沖洗期(qi)，避(bi)免潛在(zai)的(de)遺(yi)留(liu)影響(xiang)。第壹輪(lun)實(shi)驗(yan)完成(cheng)後(hou)，再次向同壹罐(guan)中註(zhu)入(ru)液(ye)氮(dan)，並(bing)在相同的(de)液(ye)氮(dan)水平(ping)和重復(fu)次(ci)數(shu)下重復(fu)第(di)二次實(shi)驗(yan)。

　　使用(yong)SAS中的通(tong)用線(xian)性混合(he)模(mo)型(xing)程序(xu)GLIMMIX分(fen)析了(le)液(ye)氮(dan)液位(wei)、位(wei)置(zhi)和雙(shuang)向相互作用對儲(chu)罐(guan)溫度(du)的影響(xiang)數(shu)據[8]。該(gai)模(mo)型(xing)包括位(wei)置(zhi)、體積(ji)和按(an)位(wei)置(zhi)劃分(fen)的體積(ji)的影響(xiang)。計(ji)算了(le)所(suo)有儲罐位(wei)置(zhi)的(de)溫(wen)度(du)變化(hua)和小(xiao)二乘平(ping)均溫度的參(can)數(shu)估計(ji)值。顯(xian)著(zhu)性在(zai)P<0.05時(shi)較好。

精液(ye)儲(chu)罐中(zhong)的溫度對於維持(chi)儲(chu)罐內儲(chu)存的(de)精液(ye)的(de)存活(huo)率至(zhi)關重要(yao)。測量(liang)溫(wen)度(du)的(de)三(san)個位(wei)置(zhi)的(de)溫(wen)度(du)變化(hua)不壹致(zhi)。根據估(gu)計(ji)的方差，位(wei)置(zhi)2(頸(jing)部部以下7厘(li)米(mi)，霜線(xian)以(yi)下)表(biao)現出大(da)的變異性(表(biao)1)。位(wei)置(zhi)和位(wei)置(zhi)體積(ji)對儲(chu)罐(guan)溫度(du)有影響(xiang)(P<0.01)。

　　與頸(jing)部部以下7cm(霜線(xian)以(yi)下)相比(bi)，頸(jing)部部以下2cm的平(ping)均水箱(xiang)溫度(du)更高(P<0.01)(6.4±0.1°C vs-38.3±0.4°C)(表(biao)1)。我們(men)關於位(wei)置(zhi)2溫(wen)度(du)(霜線(xian)以(yi)下)的數(shu)據非(fei)常(chang)接(jie)近Kaproth報(bao)告(gao)的上限(xian)(-40°C)[4]。隨(sui)著氮(dan)水平(ping)的(de)降(jiang)低(di)，溫度保(bao)持(chi)在(zai)0°C以上，在(zai)頸(jing)部部以下2厘(li)米(mi)處(chu)(位(wei)置(zhi)1)沒(mei)有變化(hua)。相比(bi)之下，在位(wei)置(zhi)2，隨(sui)著(zhe)液(ye)氮(dan)體積(ji)的減(jian)少，頸(jing)部部以下7厘(li)米(mi)處(chu)的(de)溫(wen)度升高(從-41.1±1°C升(sheng)高(gao)到-36.7±1°C;P<0.05)(圖(tu)2)。這(zhe)些(xie)結(jie)果(guo)與之前(qian)的報(bao)告(gao)[4]壹致(zhi)，即頸(jing)部區域(yu)溫度升高與儲(chu)罐(guan)液氮(dan)液位(wei)較低(di)有關。盡管位(wei)置(zhi)3(液(ye)氮(dan)水平(ping)以(yi)上2厘(li)米(mi))的(de)平(ping)均溫度為-186.3±0.1(表(biao)1)，但隨著(zhe)液氮(dan)體積(ji)的減(jian)少，溫(wen)度(du)升高(gao)(從(cong)-187±0.3°C升(sheng)高(gao)到(dao)-185±0.3°C;P<0.05)。