幹(gan)細(xi)胞的(de)存儲(chu)壹般采用液氮(dan)罐，這(zhe)種(zhong)方(fang)法能夠有(you)效(xiao)抑制(zhi)細胞的(de)代(dai)謝(xie)活動，降低細胞老(lao)化速度(du)。然而(er)，存儲(chu)時間過長可能導致(zhi)細胞內的結構(gou)和(he)功能發生(sheng)變(bian)化。研究表明，幹(gan)細(xi)胞在(zai)液氮(dan)中可以保存多(duo)年，但的存儲(chu)期限應(ying)控(kong)制在(zai)5到10年之間，超過(guo)這(zhe)個期限，細(xi)胞的(de)生物學特性可(ke)能會逐漸減(jian)弱。
影(ying)響幹(gan)細(xi)胞液(ye)氮(dan)存儲(chu)效(xiao)果(guo)的(de)因(yin)素(su)有多個，包括(kuo)細(xi)胞類型、冷(leng)凍(dong)過(guo)程、復蘇方法及(ji)後續(xu)處(chu)理等。不同類型的幹(gan)細(xi)胞在(zai)液氮(dan)中的存儲(chu)穩(wen)定(ding)性可(ke)能不同。例(li)如，人(ren)誘導多(duo)能幹(gan)細(xi)胞(iPSCs)在(zai)液氮(dan)中的保存期限普(pu)遍較(jiao)長，可以達(da)到15年以上，而(er)某(mou)些成(cheng)人(ren)幹(gan)細(xi)胞在(zai)經(jing)過(guo)5年的(de)儲(chu)存後(hou)，增殖能力(li)可能下降30%以上。
細(xi)胞冷(leng)凍(dong)過(guo)程中，使用的冷(leng)凍(dong)保(bao)護劑(ji)也會影(ying)響存儲(chu)效(xiao)果(guo)。常(chang)用的冷(leng)凍(dong)保(bao)護劑(ji)有二(er)甲基(ji)亞(ya)碸(DMSO)和(he)甘油(you)。這(zhe)些保(bao)護劑(ji)可以防(fang)止(zhi)細(xi)胞在(zai)冷(leng)凍(dong)和(he)解凍過(guo)程中形成冰(bing)晶(jing)，減(jian)少(shao)細胞損(sun)傷(shang)。研(yan)究(jiu)顯(xian)示(shi)，添(tian)加10%
DMSO的幹(gan)細(xi)胞在(zai)冷(leng)凍(dong)後(hou)復蘇(su)率可(ke)達(da)到70%-90%，而不加保護劑(ji)的幹(gan)細(xi)胞復(fu)蘇率可(ke)能低於(yu)50%。
復(fu)蘇(su)過(guo)程同樣關(guan)鍵(jian)。在復蘇幹(gan)細(xi)胞時，應(ying)盡量(liang)避免快速升溫，以減少(shao)細胞膜的(de)破(po)裂風險。推薦(jian)的(de)方法是將(jiang)冷(leng)凍(dong)管(guan)從(cong)液氮(dan)中取出(chu)後，立(li)即(ji)放(fang)入(ru)37°C的(de)水(shui)浴中，持續攪(jiao)拌，直至細(xi)胞完(wan)全(quan)融化。此(ci)過程應(ying)控(kong)制在(zai)1-2分(fen)鐘內，以確保(bao)細胞的(de)活性和(he)功能。
根據壹項(xiang)關(guan)於(yu)人(ren)類成(cheng)體(ti)幹(gan)細(xi)胞的(de)研究，存儲(chu)超(chao)過10年的(de)細(xi)胞在(zai)增殖和(he)分化能力(li)上均出(chu)現(xian)顯(xian)著下降，尤其在神(shen)經(jing)分(fen)化和(he)骨(gu)分(fen)化方面(mian)，增殖速(su)率下降了(le)約(yue)40%。這(zhe)表明，雖然液(ye)氮(dan)可以有效(xiao)延(yan)長細胞的(de)存儲(chu)期限，但細胞質(zhi)量仍然需(xu)要(yao)關(guan)註(zhu)。
在(zai)臨(lin)床(chuang)應(ying)用中，幹(gan)細(xi)胞的(de)質量直接(jie)關(guan)系(xi)到治療(liao)效(xiao)果(guo)。如臍(qi)帶(dai)血幹(gan)細(xi)胞的(de)存儲(chu)，標準(zhun)建議是在2-5年內進(jin)行(xing)臨(lin)床(chuang)使(shi)用，超過(guo)10年的(de)臍(qi)帶(dai)血樣本(ben)，其細(xi)胞功(gong)能可能受到顯著影響，活細(xi)胞比(bi)例(li)通常低於(yu)70%。這(zhe)樣的(de)情況往往使得(de)長期存儲(chu)的(de)幹(gan)細(xi)胞無(wu)法滿(man)足(zu)治療(liao)需求(qiu)。
國外(wai)壹些研究機構(gou)也提出(chu)了(le)關(guan)於(yu)幹(gan)細(xi)胞存儲(chu)的(de)標準(zhun)化建議。例(li)如，美國國立(li)衛生(sheng)研(yan)究院(yuan)(NIH)建議，幹(gan)細(xi)胞在(zai)液氮(dan)中存儲(chu)超(chao)過10年時，應(ying)定(ding)期進(jin)行(xing)活(huo)性檢(jian)測(ce)，確(que)保(bao)細胞的(de)增殖能力(li)和(he)分化潛(qian)力(li)。檢測(ce)方(fang)式(shi)包括(kuo)細(xi)胞計(ji)數、流式細(xi)胞術以及(ji)功能性實(shi)驗等(deng)。
綜(zong)上(shang)所述(shu)，幹(gan)細(xi)胞在(zai)液氮(dan)罐中的存儲(chu)期限確(que)實(shi)對細胞的(de)質量和(he)功能產生影(ying)響。適(shi)當(dang)的存儲(chu)時間、冷(leng)凍(dong)保(bao)護劑(ji)的使(shi)用、科(ke)學的復蘇流程都是確保幹(gan)細(xi)胞在(zai)液氮(dan)中保持活(huo)性與(yu)功(gong)能的關(guan)鍵(jian)因(yin)素(su)。隨(sui)著(zhe)技(ji)術的不斷發展，未來(lai)可(ke)能會有(you)更的儲(chu)存和(he)復蘇技(ji)術，使幹(gan)細(xi)胞的(de)保存更加安全(quan)有(you)效(xiao)。
金鳳液氮(dan)罐
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