液氮罐在(zai)細胞(bao)培(pei)養過程中的使用

　　液氮罐在(zai)細胞(bao)培(pei)養過程中的使用

　　細胞(bao)培(pei)養的壹般過程(cheng)主(zhu)要(yao)包(bao)括四(si)個(ge)步(bu)驟:準(zhun)備(bei)、材料提取(qu)、培(pei)養和(he)冷(leng)凍復(fu)蘇(su)。為了(le)保存(cun)細胞(bao)，尤(you)其是不易(yi)獲得的突變細胞(bao)或(huo)細胞(bao)株(zhu)，應(ying)冷(leng)凍細胞(bao)。冷(leng)凍溫度(du)壹(yi)般(ban)采(cai)用196℃液氮溫度(du)，將(jiang)細胞(bao)收集(ji)到(dao)冷(leng)凍管(guan)中，加(jia)入含有(you)保護劑(ji)(壹般為二甲(jia)基亞或甘油(you))的培養基，冷(leng)卻速度(du)壹(yi)定，後儲(chu)存(cun)在(zai)液氮罐中。在(zai)低的溫度(du)下，細胞(bao)的保存時(shi)間(jian)幾乎(hu)是無(wu)限(xian)的。

　　胚胎冷(leng)凍保(bao)存(cun)技(ji)術(shu)

　　胚(pei)胎(tai)冷(leng)凍保(bao)存(cun)技(ji)術(shu)是指利(li)用低溫保(bao)護(hu)劑在(zai)低溫條(tiao)件下保存(cun)胚胎(tai)的技(ji)術(shu)。這(zhe)項技(ji)術(shu)是由(you)於人工(gong)授精技(ji)術(shu)在(zai)20世紀下半葉(ye)的廣(guang)泛應(ying)用而產(chan)生(sheng)的。動物胚胎(tai)的冷(leng)凍保(bao)存(cun)原(yuan)理是由(you)於低溫降(jiang)低(di)了(le)胚胎(tai)內(nei)的變質反(fan)應速度(du)。溫度(du)越低(di)，胚(pei)胎(tai)保存時(shi)間(jian)越長(chang)。

　　目(mu)前(qian)研(yan)究了(le)慢(man)速冷(leng)凍、快速冷(leng)凍、壹(yi)步(bu)冷(leng)凍、直(zhi)接(jie)移(yi)植(zhi)冷(leng)凍、玻(bo)璃(li)化冷(leng)凍等多種胚(pei)胎(tai)冷(leng)凍保(bao)存(cun)方法(fa)。玻璃化冷(leng)凍法(fa)的步(bu)驟如下:

　　①在(zai)室溫下將(jiang)胚(pei)胎(tai)放入25%的玻璃溶(rong)液(VS液)中進(jin)行預(yu)處理(li)15分(fen)鐘(zhong)。

　　②在(zai)高濃(nong)度(du)(75%190%)的VS液中保(bao)存預(yu)處理(li)後的胚胎20-40分(fen)鐘(zhong)。金(jin)鳳液氮罐

　　③將(jiang)經(jing)過兩(liang)步(bu)抗(kang)凍處(chu)理(li)的胚胎直(zhi)接(jie)放入液氮中保(bao)存。金(jin)鳳液氮罐

　　另外(wai)，菌(jun)種、疫(yi)苗(miao)、骨(gu)組織、精子(zi)等物質也(ye)可以用(yong)液氮罐保存(cun)，都能(neng)達(da)到良(liang)好的長(chang)期(qi)儲(chu)存(cun)效果。